數字PCR服務

第三代PCR技術——數字PCR技術簡介

? ? ? ?數字PCR技術是繼一代普通PCR、二代熒光定量PCR之后的第三代PCR技術。該技術將一個樣本分成幾到幾十萬份,分配到不同的反應單元,每個單元包含一個或多個拷貝的目標分子( DNA 模板) ,在每個反應單元中分別對目標分子進行PCR擴增;擴增結束后,將有熒光信號的微滴判讀為1,沒有熒光信號的微滴判讀為0,最終根據泊松分布原理以及陽性微滴的比例,計算出待檢靶分子的濃度或拷貝數。

? ? ? ?數字PCR 是一種全新的絕對定量方式,與傳統定量 PCR 相比具有以下優點:

? ? ? ?絕對定量:不再依賴于 Ct 值和標準曲線,直接給出靶序列的起始濃度,實現真正意義上的絕對定量。

? ? ? ?更高靈敏度與特異性:數字PCR可實現萬分之一稀有樣本的絕對定量,可用于極微量核酸樣本檢測、復雜背景下的稀有突變檢測、表達量微小差異鑒定、單細胞基因表達等方面。

? ? ? ?數字PCR在分子診斷領域將會發揮巨大的作用,數字 PCR 適用于腫瘤生物標志物研究、拷貝數變異分析、微生物檢測、轉基因生物檢測、mRNA和miRNA檢測、基因相對表達研究等,并對遺傳病、癌癥、產前診斷的研究提供了一種全新的技術思路與手段,具有廣泛的、不可替代的應用前景。


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銳訊DropX-2000平臺特點



四通道檢測FAM/HEX VIC/CY5//ROX 四色熒光檢測,提升數字PCR系統對多重PCR的包容性;

一體化芯片設計可快速生成20,000~30,000個均勻微滴,液滴均一穩定、尺寸均一;全封閉體系,避免交叉污染。

數據質控及回溯:支持圖像回溯及樣本一周內復測。

兼 容 染 料 法 和 探 針 法 及 其 他 類 似 原 理 熒 光 方 法



銳訊數字PCR服務項目:


服務編號

服務內容

實驗耗時

03.04.0002

樣本DNA抽提及模板制備

1-2個工作日

03.04.0003

樣本RNA抽提及模板制備

1-2個工作日

03.04.0004

RNA樣本反轉錄

1-2個工作日

03.04.0005

引物探針設計

5-7工作日

03.04.0006

引物探針合成

5-7個工作日

03.04.0007

數字PCR檢測

1-3個工作日



送樣說明

DNA樣品:純度OD260/280比值為1.6-1.8,濃度≥10 ng/μl,體積≥10μl。需要冰袋運輸。

RNA樣品:純度OD260/280比值為1.8-2.0,濃度≥20 ng/μl,體積≥20μl。需要干冰運輸。

暫不接受樣本:

全血、尿液、糞便等。

交付報告:

實驗報告:包括實驗方法、步驟、所用試劑、儀器型號及相關分析數據等。